一．背景
近年來, 微量元素以其巨大的生物學作用、生理功能及臨床診療的實用價值引起了人們對中成藥中無機元素尤其是微量元素的研究興趣。現代研究表明, 在中成藥藥效發揮過程中, 微量元素的協同作用不可忽視, 適量的微量元素不僅可以促進機體的生長發育, 而且還可以提高機體的免疫功能, 降低人類對疾病的易感性。
二．微量元素的測定
微量元素的測定可為闡明中藥的作用機理、改造和新藥的創新提供基礎數據, 也能為中藥材的鑒定和改進提供依據。
原子吸收光譜法具有靈敏度高、選擇性好、精密度高、分析速度快等優點。利用原子吸收光譜法首次測定了老年咳喘片、復方半夏片、胃痛寧片、拳參片、參芪降糖膠囊、夏桑菊顆粒和美國洋參含片7種中成藥中Ca , Mg , Fe , Zn ,K, Na , Mn , Cu , Cr , Co ,Sr , Ni , Cd 和Pb 元素的含量。詳細研究了消化液(混酸) 種類、混酸溶液中HNO3 和HClO4的比例、消化液體積及消化時間對測定結果的影響。
三．應用方案說明
1.儀器
原子吸收分光光度計,電熱干燥箱，14種元素空心陰極燈，電子分析天平，燒杯等。
2 .試劑及標準溶液
14種元素(Ca , Mg , Fe , Zn ,K, Na , Mn , Cu , Cr , Co ,Sr , Ni , Cd , Pb) 的標準溶液均購自國家標準物質研究中心(儲備液的濃度除Cr 為1 000μg/mL外, 其余元素均為100μg/mL) 。HNO3, HClO4,H2SO4,HCl,H2O2。實驗用水為超純水。
3 .樣品來源及處理
實驗所用的7種中成藥老年咳喘片、復方半夏片、胃痛寧片、拳參片、參芪降糖膠囊、夏桑菊顆粒、美國洋參含片均為市售。
樣品溶液的制備: 取適量的藥品(丸劑用研缽預先研碎,膠囊則使用囊內顆粒)置于電熱干燥箱中,在100℃下烘干1h ,冷卻后置于干燥器中。準確稱取1g 左右的藥品于100mL 的小燒杯中,加入20 mL HNO3-HClO4(3∶1)混酸后加熱消化40 min , 定量轉移并定容至100mL 。取上層清液進行測定(必要時進行適當稀釋) 。
4.混酸種類的選擇
為找出適宜的消化體系, 研究了HNO3-HClO4 ,HNO3-HCl , HNO3-H2SO4 和HNO3-H2O2 幾種消化體系對測定結果的影響。實驗結果表明: 采用HNO3-HClO4 混酸體系作消化液比較合適。
HNO3-HClO4 混酸中HNO3 和>HClO4 體積比的影響以拳參片中Cu ,Fe , Zn , Mn 和Ni 的含量測定為例, 研究了混酸消化液中HNO3 和HClO4 體積比分別為1∶1 , 3∶1 ,4∶1 , 5∶1 , 7∶1 , 9∶1 的影響。可見, HNO3-HClO4體積比為3∶1 時消化效果較好。
5.消化時間的影響
仍以Cu , Fe , Zn , Mn 和Ni 的含量測定為例, 使用體積比為3∶1 的HNO3-HClO4 混酸作為消化體系, 固定混酸體積為15mL , 研究了消化時間對測定結果的影響。結果表明, 40min 的消化時間即可達到最佳消化效果。
6.消化液體積的影響
以3∶1 的HNO3-HClO4 混酸體系為消化液并固定消化時間為40min、稱樣質量為1.0g , 研究了混酸體積分別為8 ,12 , 16 , 20 , 24mL 時對測定結果的影響(仍以拳參片中Cu ,Fe , Zn , Mn和Ni 的含量測定為例) 。可見, 混酸體積為20mL 即可獲得滿意的測定結果。
7.標準曲線及方法準確度試驗
將14種元素的儲備液稀釋成濃度適宜的系列標準溶液,采用六標準定標準曲線法, 按表1 所列儀器條件進行測定。結果表明, 14 種元素的工作曲線均為直線,且相關系數均大于0.997 , 表明工作曲線的線性關系良好。為了進一步考察方法的準確性, 以拳參片為例作了加標回收率試驗(為保證準確度, 加標回收率試驗平行做3份, 每份平行測定3次,然后取平均值)。
8.靈敏度和檢出限
按文獻計算出方法的靈敏度和檢出限。
9.樣品中14 種微量元素的測定
準確稱量1.0 g 的樣品, 按1.3 節中樣品處理方法處理樣品。按所列儀器工作條件對樣品溶液進行測定。
四．方案結果說明
從測定結果可以看出, 所選7 種中成藥中Ca , Mg , Fe ,K和Na 五種元素的含量普遍比較豐富。但隨著品種和功能主治作用的不同, 各藥物中微量元素的含量也大不一樣。如治療糖尿病類藥物中Mn 含量較高。胃痛片中含有較高的Sr, Mn 和Cu 元素等。
同時, 對人體有害的Cd和Pb 在某些藥物中也有一定濃度，應引起關注。
