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行業(yè)應(yīng)用

維生素B1的測(cè)定

時(shí)間:2015-11-3 9:48:28      閱讀:2214

一、維生素B1

維生素B1(VB1)又叫硫胺素,食品中VB1的存在形式如下:

⑴ 常以游離態(tài)存在;

⑵復(fù)合脂形式存在(磷蛋白);

⑶ 輔羧酶形式存在

VB1在酵母、米糠、麥胚、花生、黃豆以及綠色的蔬菜和牛乳、蛋黃中比較豐富,動(dòng)物組織不如植物含量豐富。

VB1的性質(zhì)如下:

⑴ VB1在中性、堿性下不穩(wěn)定,易分解;

⑵ VB1在酸性條件下穩(wěn)定,即使加熱酸性也穩(wěn)定;

⑶ VB1為白色結(jié)晶,微溶于C2H5OH,不溶于乙醚或CHCl3,易溶于水。

二、VB1的測(cè)定

用熒光法測(cè)定。所用儀器包括熒光分光光度計(jì)勻漿機(jī)恒溫箱、燒杯等。

⑴ 原理

硫胺素在堿性鐵氰化鉀溶液中,被氧化成一種蘭色熒光物質(zhì),即為硫色素,在紫外光下,硫色素發(fā)出熒光。

⑵ 方法

① 萃取

100g樣品于干燥燒杯中,加入100ml0.1N H2SO4,打成勻漿,煮沸30分鐘,稱取一定的樣品經(jīng)高壓鍋121℃、20分鐘高壓酸解

② 水解

在酸解的樣品中冷卻后加入含有10%糖化酶的10ml2.5MNaAC溶液,搖勻,用15%NaOH調(diào)PH=4.5,用淀粉酶使淀粉水解,也可用磷酸酶使淀粉水解,于50℃恒溫箱中12小時(shí)。

③ 純化

采用柱層析提純,吸附劑采用的是人造浮石。人造浮石用25%KCl溶液分?jǐn)?shù)次洗滌,主要是把VB1吸附上去,吸附上去后,再用熱水淋洗,最后用25%KCl-HAC把VB1洗脫下來,這樣就得到純VB1,再根據(jù)上面的原理在堿性下分析。

④ 分析 

裝填柱子(離子交換柱)→ 提純 →氧化 → 測(cè)定。


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