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高效液相色譜法的特點和分類

時間:2017-2-18 9:57:38      閱讀:1618

一、高效液相色譜法的特點

高效液相色譜法是20世紀60年代末在經典液相色譜的基礎上發展起來的一種現代色譜分析方法,歷史上曾出現過不同的叫法,如高壓液相色譜(HPLC)、高速液相色譜(HSLC)和高分辨液相色譜(HRLC)。就分離原理而言,HPLC與經典柱層析(色譜)沒有本質的區別,但由于采用了高壓輸液泵、高效微粒固定相和高靈敏度檢測器,HPLC在分析速度、分離效率、檢測靈敏度和操作自動化方面,都達到了可與GC相比的程度,并保持了樣品適用范圍廣、流動相種類多和便于制備的柱層析優點,在生物工程、制藥工業、食品工業、環境監測和石油化工等領域獲得了廣泛的應用。

HPLC的特點如下:

①樣品適用范圍廣;

②分離效率高;

③檢測靈敏度高;

④分析速度快;

⑤樣品回收方便。

二、高效液相色譜法的分類

HPLC的分類方法有多種,比較常見的有三種。

(1)按照分離機理分類

①吸附色譜②分配色譜③離子交換色譜(IEC)④體積排阻色譜(SEC)⑤親和色譜(AC)

(2)按照色譜柱洗脫動力學分類

①洗脫法②前沿法③置換法

(3)按照分離目的分類

①分析液相色譜②制備液相色譜

三、HPLC分析常用的樣品處理技術

包括粉碎、冷凍干燥、氣體萃取(頂空分析和吹掃-捕集)、溶劑萃取(回流或索氏萃取,加壓溶劑萃取)、固相萃取、固相微萃取、超臨界流體萃取、微波萃取、超聲波萃取、微透析、衍生化、膜分離、蒸餾、吸附、離心、過濾、濃縮和溶解等。

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