一、無菌室的一般要求
1、需要建立無菌室管理制度
2、保持良好的衛生：相對濕度40%---60%，溫度20—22 ℃，最好安裝空調。
3、無菌室不得進行其他工作，非操作所使用的物件一律不得放入，檢后的余樣不得存放。
4、紫外燈的使用期限一般為300小時，要記錄使用時間，到期更換
二、器材及場所的滅菌消毒
微生物檢驗用器材及場所必須進行滅菌或消毒處理，不同的對象采用不同的處理方法。
1．高壓蒸汽滅菌: 工作服、口罩、稀釋液等，置高壓殺菌鍋內，一般采用121℃滅菌半小時,當然不同的培養基有不同的要求,應分別處理。
2．火焰滅菌： 接種針、接種環等可直接火焰滅菌。
3．高溫干燥滅菌： 各種玻璃器皿、注射器、吸管等，置于干燥箱中160℃滅菌2小時。
4．一般消毒: 無菌室內的凳、工作臺、試管架、電子天平、待檢物容器或包裝均無法進行滅菌，必須用其他方法進行消毒處理，采用2%石炭酸或來蘇兒水溶液擦拭消毒，工作人員的手也用此法進行消毒。
5．空氣的消毒： 開啟紫外燈照射30―60分鐘 即可。
三、準備工作
1．先進行無菌室空間的消毒，開啟紫外燈30―60分鐘。
2．檢驗用的有關器材， 搬入無菌室前必須分別進會滅菌消毒。
3．操作人員必須將手清洗消毒，穿戴好無菌工作衣、帽和鞋，才能進入無菌室。
4．進入無菌室后再一次消毒手部，然后才進行檢驗操作。
四、操作過程注意事項
1．動作要輕，不能太快，以免攪動空氣增加污染；玻璃器皿也應輕取輕放，以免破損污染環境。
2．操作應在近火焰區進行。
3．接種環、接種針等金屬器材使用前后均需灼燒，灼燒時先通過內焰，使殘物烘干后再灼燒滅菌。
4．使用吸管時，切勿用嘴直接吸、吹吸管，而必須用洗耳球操作。
5．觀察平板時不好 開蓋，如欲沾取菌落檢查時，必需靠近火焰區操作，平皿蓋也不能 大開，而是上下蓋適當開縫。
6．進行可疑致病菌涂片染色時，應使用夾子夾持玻片，切勿用手 直接拿玻片，以免造成污染，用過的玻片也應置于消毒液中浸泡消毒，然后再洗滌。
7．工作結束，收拾好工作臺上的樣品及器材，最后用消毒液擦拭工作臺。
