無論何種檢測(cè)器，流通池的設(shè)計(jì)結(jié)構(gòu)和部件都非常重要，其體積和構(gòu)型直接影響檢測(cè)器的靈敏度。正確認(rèn)識(shí)流動(dòng)池的結(jié)構(gòu)、原理、使用和選擇，對(duì)于色譜檢測(cè)有著重要的意義。
本文主要說明不同體積的流通池對(duì)于色譜檢測(cè)造成的影響。
一、流通池的體積對(duì)檢測(cè)限和分辨率的影響
使用較大的流通池可獲得最佳的檢測(cè)限。使用較小的流通池可以獲得最佳的峰分辨率。
較大的流通池，光通量和光程相比較大一些，樣品通過流通池時(shí)，光敏元件上就會(huì)得到比較大的光強(qiáng)，并且由于光程較大，所以靈敏度就會(huì)比較高，靈敏度的增大更有利于得到較好的檢測(cè)限。
較小的流通池雖然光通量較弱，但由于池徑較小，光程較短，因此樣品在流通池內(nèi)的擴(kuò)散較小，使峰的分辨率得到提高。
為了提高靈敏度，減小池內(nèi)色譜峰擴(kuò)展，要求流通池長(zhǎng)而內(nèi)徑小，池體積愈小愈好。增加池的光程會(huì)使檢測(cè)靈敏度增大，但光程的提高有一定的限制。為了降低池體積引起的峰擴(kuò)展，當(dāng)光程增加時(shí)，樣品池的內(nèi)徑必須減少，但結(jié)果導(dǎo)致光敏元件上光照減少，使信噪比降低。所以兩種效果是矛盾的。除非在光敏元件上有很低的內(nèi)在噪音水平，否則提高靈敏度的程度有一定局限。
因此，流通池的池體積是影響檢測(cè)器靈敏度和分辨率的主要因素，欲得到滿意的靈敏度和分辨率應(yīng)根據(jù)色譜柱的柱徑選擇合適的池體積。
二、流通池體積對(duì)線性范圍的影響
根據(jù)比耳定律，吸光物質(zhì)的吸光度與流通池的光程長(zhǎng)度和濃度成正比。
當(dāng)光程一定時(shí)，在檢測(cè)波長(zhǎng)下，給定的吸光物質(zhì)的吸光度只與其摩爾濃度成正比，因此可以通過測(cè)定待測(cè)組分的在檢測(cè)波長(zhǎng)下的噪聲，根據(jù)2倍噪聲求出最小檢測(cè)濃度，進(jìn)而求出最小檢測(cè)量。最小檢測(cè)濃度是考驗(yàn)儀器的靈敏度的參數(shù)。最小檢測(cè)濃度數(shù)值大，儀器的靈敏度就小，不能反應(yīng)真正的噪音和漂移水平。
根據(jù)上述公式也可以看出，檢測(cè)器流通池的光程越大，檢測(cè)限越小。定量分析的準(zhǔn)確度很大程度上取決于濃度檢測(cè)線性范圍。在該線性范圍內(nèi)具有良好的線性，其上限受色譜柱容量的限制，若使用大容量的色譜柱，線性范圍會(huì)更大。
當(dāng)流通池的體積一定時(shí)，靈敏度隨1/d的增加而增高，在考慮流動(dòng)相干擾并保證光通量的前提下，應(yīng)盡可能選擇長(zhǎng)光程流通池，檢測(cè)壓力及溫度也影響系統(tǒng)分辨率，在較高壓力及溫度下色譜分離較好。
三、流通池光程長(zhǎng)度和池內(nèi)徑對(duì)靈敏度和信噪比的影響
池體積確定后，還必須選擇適當(dāng)?shù)墓獬涕L(zhǎng)度L和池內(nèi)徑d，根據(jù)朗伯-比耳定律
根據(jù)朗伯-比耳定律ξ，m為吸光系數(shù)和樣品質(zhì)量，據(jù)上式可知，吸光物質(zhì)的質(zhì)量m一定時(shí)，吸光度A與池徑的平方成反比。樣品質(zhì)量及池體積一定時(shí)，吸光度A與光程l成正比。故選擇高1/d比值的流通池有利于增加吸光度，提高檢測(cè)的靈敏度。但1/d也不宜過大，因?yàn)椋?：1/d過大，光損失增加，光通量減小。2：光程L愈大，流動(dòng)相的干擾吸收愈大。
流通池光程越長(zhǎng)，生成的信號(hào)越高。盡管通常增加光程會(huì)使噪聲提高，但噪音提高幅度很小，信噪比還是會(huì)增大。
四、池體積對(duì)靈敏度的影響
流通池體積大小也是色譜檢測(cè)的關(guān)鍵，當(dāng)最窄半峰寬色譜峰體積的1/3等于流通池體積時(shí)，方能得到最佳靈敏度，最窄半峰寬色譜峰的體積與柱徑柱長(zhǎng) 柱效及色譜分離條件有關(guān)，其中柱徑是決定最窄半峰寬色譜峰體積的主要因素，當(dāng)其它條件不變時(shí)，柱徑越大，最窄半峰寬色譜峰的體積也愈大，因此，要得到滿意的色譜峰效果，必須選擇合適的柱徑和池體積。若池體積太大，不僅會(huì)降低靈敏度，而且還會(huì)影響系統(tǒng)分辨率。
五、峰寬（響應(yīng)時(shí)間）的設(shè)置對(duì)信噪比的影響
響應(yīng)時(shí)間增加一倍，采集頻率降低一倍，而峰寬增加一倍，因此峰寬的設(shè)置，也就影響到響應(yīng)時(shí)間的變化，峰寬參數(shù)設(shè)置太大，采集頻率太低，會(huì)使峰失真，影響信噪比和分離度。檢測(cè)器響應(yīng)時(shí)間不影響色譜峰面積和峰形對(duì)稱度，但增加檢測(cè)器響應(yīng)時(shí)間，可以明顯減小檢測(cè)器短期噪聲，導(dǎo)致色譜峰峰高降低、峰形變寬（尤其對(duì)弱保留組分的尖銳色譜峰作用顯著），信噪比增大，也使線性范圍擴(kuò)大。
隨著檢測(cè)器響應(yīng)時(shí)間設(shè)置的增大，檢測(cè)器短期基線噪聲明顯減小，峰高略有下降，因此信噪比增大，檢測(cè)限降低，而線性范圍的上限變化不大。因此，適當(dāng)增大檢測(cè)器響應(yīng)時(shí)間不僅可以得到低的檢測(cè)限，也可使線性范圍變寬。但是，隨著檢測(cè)器響應(yīng)時(shí)間的增加，同時(shí)也會(huì)帶來其他的問題，隨著濾波常數(shù)的增加，峰高有減小趨勢(shì)。在同一組實(shí)驗(yàn)中，濾波常數(shù)對(duì)保留時(shí)間小的組分的影響較大，組份出峰越晚，所受影響越小，對(duì)于有較大保留的組分幾乎無影響。由于出峰早的組分，所得到的色譜峰峰寬較窄，峰形尖銳，也即其中所包含的信號(hào)頻率較高，通過調(diào)整適當(dāng)響應(yīng)時(shí)間可以將其中的一部分高頻信號(hào)濾掉，而使其原有的信號(hào)值改變。強(qiáng)保留組分出峰較晚，所得到的色譜峰展寬嚴(yán)重，其中所包含的信號(hào)頻率相對(duì)較低，通過調(diào)節(jié)響應(yīng)時(shí)間來濾除高頻信號(hào)將不很明顯。理想的響應(yīng)時(shí)間取決于色譜峰寬。
理想的響應(yīng)時(shí)間取決于色譜峰寬，將峰寬設(shè)置為盡可能接近于色譜圖中目標(biāo)窄峰的寬度，流通池的體積應(yīng)接近于最窄峰體積的1/3（最窄峰半峰高處峰寬乘于流速1/3）， 增加光程會(huì)使流通池的體積增加，峰寬也會(huì)增加，但不影響梯度中的分離度。
六、選擇樣品波長(zhǎng)
應(yīng)選擇大于流動(dòng)相截止波長(zhǎng)，如果要獲得最低的可能檢測(cè)限，應(yīng)選擇分析物最強(qiáng)吸收處的波長(zhǎng)，如果使用高濃度進(jìn)行分析，則應(yīng)選擇中等吸收的波長(zhǎng)，并且最好選擇光譜平坦的區(qū)域以獲得較好的線性。
（內(nèi)容來源液相色譜之家）
