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你知道液相色譜柱使用壽命多長嗎?

時間:2022-2-14 10:48:16      閱讀:5962

液相色譜柱使用壽命大約為1000針,保護柱的壽命大約為280針。色譜柱的使用壽命主要受色譜條件、使用方式和保存條件的影響。

一、色譜條件

1、在相同實驗中,以前使用的色譜柱壽命長很多

這種情況應該檢查一下色譜條件是否保持一致,樣品的組成、樣品中強吸收的污染物會破壞色譜柱的柱效。檢查管路的密封圈是否完好?脫落的密封圈會堵塞色譜柱過濾器和填料的頂層,從而影響樣品的分布。

如果可以確認色譜條件沒有變化,那么可以推測是柱床松動的原因。在實驗室和運輸過程中色譜柱劇烈的震動都會導致柱床松動。

2、在實驗中用過的所有的色譜柱在使用相同次數(shù)后全部損壞

最大可能是樣品中的成分吸附在色譜柱的頂端。可能是在流動相中不溶的沉淀物或者是強吸收的物質。

二、使用方法

按照生產商的說明使用柱子的話一般很少發(fā)生,但實際使用中會出現(xiàn)各種情況。

1、流動相pH超出使用范圍,導致的柱子鍵和相水解或基質溶解。樣品用強酸或強堿溶解的話也會發(fā)生上述情況。

2、高溫也會導致色譜柱損壞,如高溫會加速鍵合相溶解。

3、特殊柱子注意事項,例如氨基柱可以和醛,酮反應。氨基柱在不含緩沖鹽的水溶液中會顯強堿性,分解部分硅膠;

4、暴露在錯誤溶劑中的柱子會發(fā)生坍塌,因為這些柱子是基于非常松散的結構,是因顆粒之間的黏著而部分的結合在一起的。如果置于能破化這種黏著的流動相中,柱床很有可能會坍塌。氰基柱在中性溶液,苯基柱在THF中有時就會發(fā)生這種問題。這也是不要沖洗柱子的另一個理由。

5、采用合適的樣品準備技術處理樣品。用和分析柱相似的固相萃取柱進行固相萃取(SPE)。

6、使用保護柱。保護柱是作為犧牲柱裝在色譜柱前使用的,出現(xiàn)問題的時候就會被替換掉。保護柱的填料和裝填技術必須和分析柱一樣;

7、反沖柱子。反現(xiàn)在的裝填技術可以使柱子承受反沖,能更好的去除柱頭端的污染物。

三、保存條件

反相色譜柱每天實驗后的保存:使用緩沖液或含鹽的流動相,實驗完成后應用10%的甲醇/水沖洗30分鐘,洗掉色譜柱中的鹽,再用甲醇沖洗30分鐘。注意:不能用純水沖洗柱子,應該在水中加入10%的甲醇,防止將填料沖塌陷。

如色譜柱要長時間保存,必須存于合適的溶劑下。對于反相柱可以儲存于純甲醇或乙腈中,正相柱可以儲存于嚴格脫水后的純正己烷中,離子交換柱可以儲存于水(含防腐劑疊氮化鈉或柳硫汞)中,并將購買新色譜柱時附送的堵頭堵上。儲存的溫度最好是室溫。

(內容參考儀器信息網)


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