1、0~2h，配制流動相、對照品和供試品溶液等;
2、2~3h，采用A管路注入流動相(B、C、D管路一般不用，除非梯度洗脫才用到B管路)，平衡1h。如流動相中有表面活性劑，建議前一晚小流速過夜，第二天上班后將流速增至1.0ml/min，平衡1h后即可開始檢測;
3、3~5h，測定空白溶劑，一定要做到基線不漂移后方可開始檢測樣品。所謂“不漂移”，通常指以1.0%自身對照溶液主成分峰高約20%高度來設(shè)定的視野范圍觀察所得，切不可設(shè)定過小，會使雜質(zhì)峰顯得很突兀，導(dǎo)致基線不穩(wěn);
4、5~8h，配制完所有樣品，預(yù)試了對照溶液和供試品溶液，設(shè)定好自動進(jìn)樣程序，程序最后一針設(shè)定為小流速過夜，紫外燈關(guān)閉。勿設(shè)定為切換至B管路洗脫;
5、9~24h，讓儀器自動進(jìn)樣，除非不穩(wěn)定樣品采取“即配即測”方式。如尚未配制自動進(jìn)樣，建議向領(lǐng)導(dǎo)申請購買，一臺自動進(jìn)樣等于三臺手動進(jìn)樣;
6、第二天0~0.5h，檢查并計(jì)算昨晚試驗(yàn)結(jié)果，如發(fā)現(xiàn)不良記錄，將流速增至1.0ml/min，平衡30min后，測定重新配制的該樣品即可(同時(shí)回校對照一針)。無需全部重新測定，無需過度謹(jǐn)小慎微;
7、第二天0.5~2.0h，沖洗色譜柱，交給其后試驗(yàn)人員。
引申閱讀：液相色譜使用的幾點(diǎn)建議
現(xiàn)今，幾大主流品牌的液相色譜儀硬件性能已相差無幾，主要還是軟件的設(shè)計(jì)是否能使操作者得心應(yīng)手、隨心所欲。建議色譜使用者掌握各軟件的批處理、編輯樣品處理模板等功能。
1、如需使用正相系統(tǒng)，強(qiáng)烈建議專設(shè)一臺儀器，切勿采用異丙醇轉(zhuǎn)換，此舉對儀器損傷極大。
2、正相所使用的流動相(如，正己烷、環(huán)己烷等)，無需抽濾，混勻超聲后即可使用。
3、柱溫箱必須配制，如果預(yù)算低，可購買國產(chǎn)柱溫箱。
（內(nèi)容來源《實(shí)驗(yàn)與分析》）
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